核酸杂交的二次酶放大镧系元素发光时间分辨荧光分析

宋娜玲 赵启仁 李美佳 褚丽萍 庄湘莲 颜廷东 贺欣 周伟玲 张春明

引用本文:
Citation:

核酸杂交的二次酶放大镧系元素发光时间分辨荧光分析

  • 基金项目:

    天津市自然科学基金项目(043610211)

  • 中图分类号: Q503

Two-round enzyme-amplified lanthanide luminescence time-resolved fluorescence assay for nucleic acid hybridization

  • CLC number: Q503

  • 摘要: 目的 建立一种超灵敏的用于核酸杂交分析的方法。方法 通过二次酶放大、PCR扩增、Tb螯合物和时间分辨测量技术,测定前列腺特异抗原(PSA)DNA。结果 靶PSADNA测定的标准曲线线性范围大于两个数量级;灵敏度为10pmol/L(0.5fmol/孔);当靶PSADNA为10、30和60pmol/L时,准确度和精密度分别为77%~95%和12.9%~15.3%。结论 本法是一种超灵敏的、简捷和快速的全新分析方法,有很好的应用前景。
  • [1] O'Sullivan PJ, Burke M, Soini AE, et al. Synthesis and evaluation of phosphorescent digo-nucleotide probes for hybridization assays.Nucleic Acids Res, 2002,30(21):114.
    [2] Wu M, Lakowicz JR, Geddes CD, et al. Enhanced lanthanide luminescence using silver nanostructures:opportunities for a new class of probes with exceptional spectral characteristics. J Fluoresc,2005, 15(1):53-59.
    [3] Johansson MK, Cook RM, Xu J, et al. Time gating improves sensitivity in energy transfer assays with terbium chelate/dark quencher oligonucleotide probes. J Am Chem Soc, 2004, 126(50):16451-16455.
    [4] Campbell CN, Gal D, Cristler N, et al. Enzyme-amplified amperometric sandwich test for RNA and DNA. Anal Chem 2002, 74(1):158-162.
    [5] 宋娜玲,赵启仁,李美佳,等.酶放大镧系元素发光时间分辨荧光分析中关键试剂的研究.中华医学研究杂志,2006,6(12):1321-1323.
    [6] ZHONG Wei-de, HE Hui-chan, BI Xue-cheng, et al. cDNA macroarray for analysis of gene expression profiles in prostate cancer. Chin Med J, 2006, 119(7):570-573.
    [7] Ylikoski A, Elomaa A, Ollikka P, et al. Homogeneous time-resolved fluorescence quenching assay (TruPoint) for nucleic acid detection.Clin Chem, 2004, 50(10):1943-1947.
  • [1] 周春喜陈泮藻金林培王黎明 . 铽在生物活性分析中的应用. 国际放射医学核医学杂志, 1998, 22(1): 19-22.
    [2] 赵启仁王世真 . 时间分辨荧光免疫分析及其应用前景. 国际放射医学核医学杂志, 1992, 16(4): 182-188.
    [3] 周伟玲赵启仁 . 时间分辨荧光分析技术的研究进展及应用. 国际放射医学核医学杂志, 2006, 30(2): 103-106.
    [4] 刘青杰陆雪陈德清赵骅 . 《荧光原位杂交分析染色体易位估算辐射生物剂量技术方法》解读. 国际放射医学核医学杂志, 2012, 36(4): 245-248. doi: 10.3760/cma.j.issn.1673-4114.2012.04.013
    [5] 游冬青陈杞赵启仁 . TRF检测法在核酸分析中的应用. 国际放射医学核医学杂志, 1996, 20(4): 161-164.
    [6] 刘炳辰王继光肖佩新 . 荧光原位杂交技术在电离辐射剂量估算中的应用. 国际放射医学核医学杂志, 1993, 17(1): 4-8.
    [7] 王知权 . 荧光原位杂交技术与辐射生物剂量计. 国际放射医学核医学杂志, 1994, 18(6): 251-254.
    [8] Obe Get al . 电离辐射和核酸内切酶诱发DNA双链断裂作为致癌致畸致突和细胞死亡的临界损伤. 国际放射医学核医学杂志, 1993, 17(1): 18-21.
    [9] 李桂荣陆如山 . 碱性核酸内切酶在正常和照射小鼠的胸腺、脾及肝细胞核释放可溶性染色质中的作用. 国际放射医学核医学杂志, 1980, 4(3): 195-195.
    [10] 田素青 . 微核着丝粒的荧光原位杂交技术在辐射研究中的应用. 国际放射医学核医学杂志, 2002, 26(2): 83-86.
    [11] 孙元明 . 用荧光原位杂交对早先受照者剂量验证和剂量重建的探讨. 国际放射医学核医学杂志, 2001, 25(3): 134-137.
  • 加载中
计量
  • 文章访问数:  1412
  • HTML全文浏览量:  109
  • PDF下载量:  2
出版历程
  • 收稿日期:  2007-01-08

核酸杂交的二次酶放大镧系元素发光时间分辨荧光分析

  • 300192 天津, 中国医学科学院中国协和医科大学放射医学研究所、天津市分子核医学重点实验室
基金项目:  天津市自然科学基金项目(043610211)

摘要: 目的 建立一种超灵敏的用于核酸杂交分析的方法。方法 通过二次酶放大、PCR扩增、Tb螯合物和时间分辨测量技术,测定前列腺特异抗原(PSA)DNA。结果 靶PSADNA测定的标准曲线线性范围大于两个数量级;灵敏度为10pmol/L(0.5fmol/孔);当靶PSADNA为10、30和60pmol/L时,准确度和精密度分别为77%~95%和12.9%~15.3%。结论 本法是一种超灵敏的、简捷和快速的全新分析方法,有很好的应用前景。

English Abstract

参考文献 (7)

目录

    /

    返回文章
    返回