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位于线粒体外膜的相对分子质量为18 000的转运蛋白（translocator protein, TSPO），曾被称为外周的苯二氮卓类受体（peripheral benzodiazepine receptor, PBR），是在进化上具有高度保守性的转运蛋白家族成员之一，主要位于肾上腺、睾丸、卵巢等细胞的线粒体外膜上，介导类固醇的合成[1]。在中枢神经系统炎症中，TSPO高表达于激活的小胶质细胞和星形胶质细胞[2]。近年的研究结果显示，在外周组织炎症中，TSPO也高表达于巨噬细胞和单核细胞[3-4]，这表明TSPO可作为参与炎症反应的免疫细胞显像的靶点。目前，在TSPO显像中主要是用11C或18F标记TSPO配体行PET显像，如11C-（R）-PK11195、11C-PBR28、11C-DAA1106、18F-FEPPA、18F-PBR06和18F-DPA-714等[5]，且有些已进入临床应用。与发射正电子的放射性核素11C和18F相比，发射单光子的放射性核素99Tcm具有价格较低廉，来源、运输方便，半衰期长，操作方便，使用范围较广等优点，且SPECT较PET便宜、普及，因此，研发新型99Tcm标记的TSPO靶向的分子探针具有较重要的临床价值。本研究以具有与TSPO较高亲合力的新型配体CB86[6]为母体，借助其表面的氨基偶联双功能螯合剂DTPA获得DTPA-CB86，进行99Tcm标记后获得新型探针99Tcm-DTPA-CB86，行左踝关节炎症小鼠Micro SPECT/CT显像，并研究其在体内的分布情况，现报道如下。
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99Mo/99Tcm发生器购自北京原子高科股份有限公司；CB86由苏新辉课题组与武汉大学药学院洪学传课题组合作制备，并已纯化、鉴定[6]；DTPA购自生工生物工程（上海）股份有限公司；CRC-25R型放射性核素活度计为美国CAPINTEC公司产品；WIZARD 2480型γ计数仪为美国珀金埃尔默仪器公司产品；Dionex Ulti-Mate 3000型高效液相色谱（high performance liquid chromatography, HPLC）仪为美国Thermo Scientific公司产品；FM-2000型锝分析仪为北京东方圆通科技发展有限公司产品；Sep-Pak C18 Plus固相萃取柱（简称C18色谱柱）为美国Waters公司产品；nanoScan型SPECT/CT仪为匈牙利Mediso Medical Imaging System公司产品；DMEM培养基购自美国Gibco BRL公司；胎牛血清购自美国Gemini公司；小鼠巨噬细胞RAW264.7由厦门大学生命科学学院俞春东课题组赠送；BALB/c小鼠由厦门大学实验动物中心提供（4~5周龄，雌性，体重18~20 g）。其余试剂均为国产分析纯。
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向溶解有50 mg CB86的二甲基亚砜溶液中加入200 mg DTPA，在20℃下于转速为1200 r/min的磁力加热搅拌器上避光反应30 h，用C18柱纯化，得到DTPA-CB86。取1 mL高锝酸钠洗脱液（约370 MBq）加入200 μL DTPA-CB86中，再加入20 μL新鲜配制的SnCl2，置于振荡模块上100℃避光反应约30 min，冷却至室温。取出反应液，以生理盐水为展开剂，用HPLC测定标记产物的标记率。将上述反应液通过C18柱，以2 mL PBS（pH值7.4）为淋洗液进行纯化，将纯化后的反应液用上述同样的方法测定标记产物的放化纯度。取100 μL纯化后的反应液99Tcm-DTPA-CB86置于1 mL PBS中，室温放置，分别在1、2、4 h后取出反应液，用上述同样的方法测定99Tcm-DTPA-CB86的稳定性。
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按文献报道方法，在37℃、5% CO2培养箱中常规培养RAW264.7细胞[7-9]。待细胞生长至对数生长期，用0.25%胰酶消化，将RAW264.7细胞悬液铺于24孔板中（2×105个/孔），于37℃、5% CO2培养箱中培养过夜并分成两组，一组为未抑制组，另一组为抑制组，每组设3个复孔。先将99Tcm-DTPA-CB86用无血清的DMEM培养基稀释成1.11×10-1 MBq/mL。在未抑制组中加入100 μL 1.11 × 10-2 MBq 99Tcm-DTPA-CB86；在抑制组中同时加入100 μL 1.11×10-2 MBq 99Tcm-DTPA-CB86和10 μg未标记的DTPA-CB86，上述各孔用无血清培养基补充总体积至1 mL。将两组放置在37℃、5%CO2培养箱中培养，温育的时间点均为0.5、2、3和4 h。将孔板中所有的培养基完全吸出，然后加入0.5 mL冰冷的PBS洗2次，向所有孔板中加入1 mL 1 mol/L NaOH，室温下放置5~10 min。然后，用细胞刮刀轻刮孔板底部，使细胞完全脱离，吸取孔板内所有溶液和细胞，放入离心管中，用γ计数仪测定细胞的放射性计数（即反应管）以及总T管和空白管的放射性计数（各3支）。细胞摄取率= [（反应管计数-空白管计数）/总T管计数]×100%，绘制出细胞摄取曲线。
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细胞按文献[10]报道方法培养，将细胞悬液铺于24孔板中（2×105个/孔），每孔加入100 μL 1.11×10-2 MBq 99Tcm-DTPA-CB86共同培养，放入37℃、5%CO2培养箱中培养4.5、5.5、7和8 h。在每个时间点上，将孔内的细胞培养基吸走丢弃，用冷的PBS冲洗细胞2次，再加入1 mL 1 mol/L NaOH裂解细胞，收集于离心管内。将收集有细胞裂解液的离心管在γ计数仪上测定细胞的放射性计数（即反应管）以及总T管和空白管的放射性计数（各3支）。细胞摄取率=[（反应管计数-空白管计数）/总T管计数]×100%，绘制出细胞摄取曲线，间接反映99Tcm-DTPA-CB86从细胞的释放情况。
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取体重为18~20 g的BALB/c雌鼠，按文献报道方法于左下足跖皮内注射100 μL弗氏佐剂，4周时左踝关节出现炎症肿胀，视为造模成功，即可备用[11]。采用直接抽样方法选取体重相近、左踝关节中度红肿的模型鼠12只，分为3组，每组4只，经尾静脉注射100 μL、0.37 MBq 99Tcm-DTPA-CB86，并于注射后不同时间点（0.5、1.5和3 h）处死裸鼠，取心、肝、脾、肺、肾、骨、肌肉、胃、肠和左踝关节炎症组织等主要脏器及组织，测量其质量及放射性计数，经参考源校正后计算每克组织百分注射剂量率（%ID/g），以及左踝关节炎症组织与血液（arthritic ankle to blood，A/B）、左踝关节炎症组织与正常肌肉（arthritic ankle to muscle，A/M）的放射性比值。
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采用直接抽样方法选取体重相近、左踝关节中度红肿的模型小鼠6只，分为未阻断组和竞争性抑制组，每组3只。未阻断组小鼠经尾静脉注射100 μL 3.7 MBq 99Tcm-DTPA-CB86；竞争性抑制组小鼠经尾静脉注射100 μL 3.7 MBq 99Tcm-DTPA-CB86和300 μg未标记的DTPA-CB86。两组小鼠均用5%的水合氯醛经腹腔麻醉，俯卧位固定于鼠板上，分别于注射0.5、1.5和3 h时行Micro SPECT/CT显像，使用平行孔准直器，将小鼠放置于视野中心，进行Micro SPECT断层扫描成像。然后进行CT扫描，通过电脑重建后得到短轴、水平长轴及垂直长轴的小鼠SPECT/CT融合图像。
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采用SPSS 18.0软件进行统计学分析，所得数据均以均数±标准差（x± s）表示。采用Kolmogorov-Smirnov test（柯尔莫诺夫-斯米尔诺夫检验）分析数据是否符合正态分布（P > 0.1为符合正态分布标准），用Levene检验分析数据是否符合方差齐性（sig >0.05为符合方差齐性），对符合正态性分布及方差齐性的数据采用t检验，P < 0.05表示差异有统计学意义。
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经HPLC分析99Tcm-DTPA-CB86具有较高的标记率[（95.86 ±2.45）%]和放化纯度[（97.45 ± 0.69）%]。稳定性实验结果显示，99Tcm-DTPA-CB86在室温下的PBS溶液中稳定性良好，放置4 h后其标记率仍>90%。
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细胞摄取实验结果如图 1所示，小鼠RAW264.7巨噬细胞对99Tcm-DTPA-CB86的摄取率在0.5 h为（28.45 ± 1.56）%，3 h时达到最高峰[（36.45 ± 2.18）%]，4 h时摄取率虽然有所下降，仍保持在较高水平[（35.63 ± 2.21）%]。在加入过量未标记的DTPA-CB86时，RAW264.7细胞对99Tcm-DTPA-CB86的摄取明显下降，且随时间的延长而逐渐下降，与未阻断组相比，细胞摄取下降差异具有统计学意义（t=6.217，P < 0.05）。细胞释放实验结果如图 2所示，RAW264.7细胞对99Tcm-DTPA-CB86的摄取随着时间的延长而减少，4.5 h时的摄取率为（33.31±2.34）%，8 h时为（19.32±2.01）%，减少了13.99%。
图 1 RAW264.7巨噬细胞对99Tcm-DTPA（二亚乙基三胺五乙酸）-CB86的摄取曲线(n=3)
Figure 1. In vitro uptake of 99Tcm-DTPA-CB86 in RAW264.7 cells (n=3)
图 2 RAW264.7巨噬细胞对99Tcm-DTPA（二亚乙基三胺五乙酸）-CB86的摄取曲线(n=3)
Figure 2. In vitro uptake of 99Tcm-DTPA-CB86 in RAW264.7 cells (n=3)
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尾静脉注射示踪剂后，除了左踝关节炎症组织外，99Tcm-DTPA-CB86在各组织器官中的放射性分布随着时间的延长逐渐下降（表 1）。左踝关节炎症组织的放射性分布0.5 h时为（1.33±0.16）%ID/g，3 h时为最高值（2.35 ± 0.10）%ID/g；肝脏0.5 h时为最高值（5.56 ± 0.76）%ID/g，3 h时仍有较高的摄取，为（2.14 ± 0.23）%ID/g；血液中0.5 h时为（0.78 ± 0.07）%ID/g，3 h时为（0.56 ± 0.09）%ID/g。A/B和A/M的放射性比值随时间的延长逐渐增高，0.5 h时分别为（1.71 ± 0.05）和（1.32 ± 0.43），3 h时为（4.19 ± 0.21）和（3.01 ± 0.16）。
组织或器官 注射后时间/h 0.5 1.5 3 心 1.49±0.17 0.46±0.06 0.33±0.05 肝 5.56±0.76 3.82±0.97 2.14±0.23 肺 1.51±0.14 1.80±0.33 0.68±0.16 肾 2.03±0.25 1.86±0.38 1.71±0.28 脾 1.24±0.43 0.91±0.08 0.58±0.03 胃 2.76±0.36 1.77±0.31 1.34±0.21 骨 0.51±0.16 0.49±0.09 0.41±0.07 肌肉 1.01±0.12 1.47±0.12 0.78±0.02 小肠 3.48±0.59 2.83±0.63 1.97±0.28 血液 0.78±0.07 0.68±0.08 0.56±0.09 左踝关节炎症部位 1.33±0.16 2.01±0.18 2.35±0.10 表 1 99Tcm-DTPA-CB86在左踝关节炎症小鼠体内的生物学分布[x± s（%ID/g）]（n= 4）
Table 1. Biodistribution for 99Tcm-DTPA-CB86 in mice models of arthritis[x± s %ID/g)] (n = 4 for each group)
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左踝关节炎症小鼠注射99Tcm-DTPA-CB86后Micro SPECT/CT显像结果如图 3、图 4所示。未阻断组注射99Tcm-DTPA-CB86后0.5 h时左踝关节炎症部位可见放射性分布，且随时间的延长逐渐增浓，3 h时炎症部位显像最清晰（图 3），而正常组织的放射性分布随时间的延长逐渐减淡；竞争性抑制组始终未见明显的炎症部位显影（图 4）。
图 3 未阻断组左踝关节炎症小鼠注射99Tcm-DTPA-CB86后不同时间的Micro SPECT/CT显像图（方框示左踝关节炎症）
Figure 3. Micro SPECT/CT imaging of 99Tcm-DTPA-CB86 in mice models of arthritis in the unblocked group at various times after injection (box showing left arthritis)
图 4 竞争性抑制组左踝关节炎症小鼠注射99Tcm-DTPA-CB86后不同时间的Micro SPECT/CT显像图（方框示左踝关节炎症）
Figure 4. Micro SPECT/CT imaging of 99Tcm-DTPA-CB86 in mice models of arthritis in the blocked group at various times after injection (box showing left arthritis)
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CB86是一种新型TSPO拮抗剂，其IC50（半抑制浓度）（1.2 nmol/L）比TSPO特异性拮抗剂PK 11195（2.2 nmol/L）低[12]，这表明CB86对TSPO的特异性较强。CB86分子上带有氨基，且对温度和pH值有较高的耐受性，适合在特异性结合位点上进行化学修饰，且其在连接显像或治疗的药效基团后仍对TSPO有很高的亲和性。Musacchio等[13]报道在含有紫杉醇PEG-PE（聚乙二醇磷脂酰乙醇胺）微球上修饰CB86（13.6 μmol/L）能大大增强紫杉醇的抗癌效果。TSPO作为线粒体外膜的重要组成部分，参与线粒体膜渗透性转换孔的开放，调控细胞的凋亡[1]。CB86分子不能直接用于99Tcm标记，需引入双功能螯合剂，DTPA在较低的配体浓度下即对99Tcm或111In等金属核素有很高的标记率[14]。本研究中笔者先将CB86与DTPA偶联，制成DTPA-CB86，再进行99Tcm标记获得99Tcm-DTPA-CB86，且经放射性HPLC结果证实放化纯度较好。另外，99Tcm-DTPA-CB86的体外稳定性较好，放置4 h未出现放化纯度降低，有利于进行远距离配送。
体外细胞研究结果显示：小鼠RAW264.7巨噬细胞对99Tcm-DTPA-CB86的特异性摄取率在3 h时达到最高峰[（36.45 ± 2.18）%]，但同时加入过量未标记的DTPA-CB86后，细胞的摄取率显著下降；RAW264.7细胞对99Tcm-DTPA-CB86的摄取随着时间的延长而略有减少，4.5 h时摄取率为（33.31 ± 2.34）%，8 h时为（19.32 ± 2.01）%，减少13.99 %，这表明99Tcm-DTPA-CB86可以特异性地与小鼠RAW264.7巨噬细胞的TSPO结合，且亲和力高，外排少。
99Tcm-DTPA-CB86在左踝关节炎症小鼠体内的生物学分布和Micro SPECT/CT显像的研究结果表明，显像剂99Tcm-DTPA-CB86在小鼠体内的稳定性尚好，随时间延长左踝关节炎症部位仍有较高摄取，而正常组织如肝、血液、肌肉等的摄取逐渐降低，提高了A/B和A/M的放射性比值以及炎症的检出率。注射后0.5 h时左踝关节炎症部位已略见显影，3 h时炎症部位摄取仍可达（2.35 ± 0.10）%ID/g，这表明99Tcm-DTPA-CB86在炎症部位中的清除率较慢且停留时间较长，有利于炎症的显像。肝、血液、肌肉中的放射性随时间延长逐渐减低，A/B和A/M的放射性比值分别从0.5 h时的（1.71 ± 0.05）和（1.32 ± 0.43）增高至3 h时的（4.19 ± 0.21）和（3.01 ± 0.16），这表明99Tcm-DTPA-CB86在血液、肌肉等非炎症组织中的清除率较快（主要从肝脏代谢），A/B和A/M的放射性比值随时间延长逐渐增高，炎症显像更清晰，提示99Tcm-DTPA-CB86在左踝关节炎症小鼠模型中的靶向性良好，且在体内的停留时间长。在竞争性抑制实验中各时间段均未见炎症显影，未标记DTPA-CB86明显抑制了99Tcm-DTPA-CB86与炎症巨噬细胞的TSPO的结合，这表明显像剂99Tcm-DTPA-CB86能够与TSPO特异性结合。
综上所述，我们成功制备的99Tcm-DTPA-CB86可与巨噬细胞特异性结合，且经标记后保留了生物学活性。小鼠体内分布及SPECT/CT显像结果表明，其有望成为一种应用于关节炎症的SPECT显像的分子显像剂。
靶向TSPO显像剂99Tcm-DTPA-CB86的制备及其对关节炎症的SPECT/CT显像研究
Preparation and imaging of arthritis of 99Tcm-DTPA-CB86 for TSPO targeted imaging
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摘要:
目的制备99Tcm标记的转运蛋白（TSPO）配体CB86[99Tcm-DTPA（二亚乙基三胺五乙酸）-CB86]，探讨其作为TSPO靶向关节炎症显像新型分子探针的可行性。 方法通过偶联双功能螯合剂制备DTPA-CB86，进行99Tcm标记，经高效液相色谱纯化，测定其放化纯度和体外稳定性。选用巨噬细胞RAW264.7进行体外细胞结合实验，测定99Tcm-DTPA-CB86的结合率和外排率。采用弗氏佐剂建立左踝关节炎症小鼠模型，对其行99Tcm-DTPA-CB86 Micro SPECT/CT显像，并观察探针的体内分布情况。采用SPSS 18.0统计软件对符合正态分布及方差齐性的数据进行t检验。 结果99Tcm-DTPA-CB86的标记率为（95.86 ±2.45）%，放化纯度为（97.45 ±0.69）%，其在室温下的磷酸盐缓冲液中的稳定性良好，放置4 h后，其标记率仍>90%。99Tcm-DTPA-CB86能与巨噬细胞RAW264.7特异性结合，3 h的摄取率达到最高峰[（36.45 ±2.18）%]，在加入过量未标记的DTPA-CB86后，RAW264.7细胞对99Tcm-DTPA-CB86的摄取明显受到抑制[（10.43 ±2.01）%]，与未阻断时相比差异具有统计学意义（t=6.217，P < 0.05）；RAW264.7细胞对99Tcm-DTPA-CB86外排较少，摄取率从4.5 h时的（33.31 ±2.34）%到8 h时的（19.32 ±2.01）%，减少了13.99%。Micro SPECT/CT显像结果显示，99Tcm-DTPA-CB86在小鼠左踝关节炎症部位清晰可见，且能被过量的DTPA-CB86明显抑制；体内生物学分布结果表明，其具有较好的炎症靶向性；注射后3 h踝关节炎症部位的摄取仍可达（2.35 ±0.10）% ID/g。 结论99Tcm标记CB86易于制备，具有较好的理化性质及体内代谢学性质，同时具有较好的关节炎症摄取，有望发展成新的TSPO靶向SPECT关节炎症显像分子探针。 -
关键词:
- 转运蛋白 /
- 关节炎 /
- 同位素标记 /
- 锝放射性同位素 /
- 体层摄影术, 发射型计算机, 单光子 /
- 体层摄影术, X线计算机
Abstract:ObjectiveTo develope a novel radiolabeled translocator protein(TSPO) ligand CB86 targeting agent 99Tcm-diethylene-triaminepentaacetic acid (DTPA)-CB86 and evaluate its biological properties. MethodsDPTA-CB86 was prepared by coupling with a bifunctional chelating agent, and then labeled with 99Tcm to obtain 99Tcm-DTPA-CB86. The labeling efficiency, radiochemical purity, and stability were determined in vitro. In vitro cellular uptake and efflux were performed using RAW264.7 macrophage cells. Biodistribution and micro-SPECT/CT images were investigated on Freund's adjuvant-induced left arthritis in mice. SPSS 18.0 analysis software(t-test) was used to fit the normal distribution and homogeneity of variance. ResultsThe labeling yields and radiochemical purity of 99Tcm-DTPA-CB86 were (95.86±2.45)% and (97.45±0.69)%, respectively. 99Tcm-DTPA-CB86 displayed good stability, with a radiochemical purity of more than 90%, in phosphate-buffered solution(PBS) at 4 h. It also exhibited high specific TSPO binging in RAW264.7 macrophage cells in vitro. The highest uptake ratio was (36.45±2.18)% at 3 h after incubation, which then decreased significantly[(10.43 ±2.01)%; t=6.217, P < 0.05)] after adding excessive unlabeled DTPA-CB86. The difference was significant. Cell efflux analysis showed that 99Tcm-DTPA-CB86 had good cell retention by RAW264.7 cells, with only about 13.99%[decreased from (33.31±2.34)% to (19.32±2.01)% of total input radioactivity] of 99Tcm-DTPA-CB86 efflux observed during 4.5 h to 8 h of incubation. Biodistribution and SPECT/CT imaging demonstrated that the uptake of 99Tcm-DTPA-CB86 in the left arthritic ankles was significantly increased compared with that in contralateral normal ankles. Uptake in the arthritic ankles could be largely blocked by an excess of DTPA-CB86. Conclusion99Tcm-DTPA-CB86 can be readily synthesized and clearly visualize arthritis with low background, thus demonstrating its potential as a promising molecular probe targeting TSPO for arthritic SPECT imaging. -
图 1 RAW264.7巨噬细胞对99Tcm-DTPA（二亚乙基三胺五乙酸）-CB86的摄取曲线(n=3)
Figure 1. In vitro uptake of 99Tcm-DTPA-CB86 in RAW264.7 cells (n=3)
图 2 RAW264.7巨噬细胞对99Tcm-DTPA（二亚乙基三胺五乙酸）-CB86的摄取曲线(n=3)
Figure 2. In vitro uptake of 99Tcm-DTPA-CB86 in RAW264.7 cells (n=3)
图 3 未阻断组左踝关节炎症小鼠注射99Tcm-DTPA-CB86后不同时间的Micro SPECT/CT显像图（方框示左踝关节炎症）
Figure 3. Micro SPECT/CT imaging of 99Tcm-DTPA-CB86 in mice models of arthritis in the unblocked group at various times after injection (box showing left arthritis)
图 4 竞争性抑制组左踝关节炎症小鼠注射99Tcm-DTPA-CB86后不同时间的Micro SPECT/CT显像图（方框示左踝关节炎症）
Figure 4. Micro SPECT/CT imaging of 99Tcm-DTPA-CB86 in mice models of arthritis in the blocked group at various times after injection (box showing left arthritis)
表 1 99Tcm-DTPA-CB86在左踝关节炎症小鼠体内的生物学分布[x± s（%ID/g）]（n= 4）
Table 1. Biodistribution for 99Tcm-DTPA-CB86 in mice models of arthritis[x± s %ID/g)] (n = 4 for each group)
组织或器官 注射后时间/h 0.5 1.5 3 心 1.49±0.17 0.46±0.06 0.33±0.05 肝 5.56±0.76 3.82±0.97 2.14±0.23 肺 1.51±0.14 1.80±0.33 0.68±0.16 肾 2.03±0.25 1.86±0.38 1.71±0.28 脾 1.24±0.43 0.91±0.08 0.58±0.03 胃 2.76±0.36 1.77±0.31 1.34±0.21 骨 0.51±0.16 0.49±0.09 0.41±0.07 肌肉 1.01±0.12 1.47±0.12 0.78±0.02 小肠 3.48±0.59 2.83±0.63 1.97±0.28 血液 0.78±0.07 0.68±0.08 0.56±0.09 左踝关节炎症部位 1.33±0.16 2.01±0.18 2.35±0.10 
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[1] Fan J, Lindemann P, Feuilloley MG, et al. Structural and functional evolution of the translocator protein(18 kDa)[J]. Curr Mol Med, 2012, 12(4):369-386. DOI:10.2174/1566524011207040369. [2] Crawshaw AA, Robertson NP. The role of TSPO PET in assessing neuroinflammation[J]. J Neurol, 2017, 264(8):1825-1827. DOI:10.1007/s00415-017-8565-1. [3] Narayan N, Mandhair H, Smyth E, et al. The macrophage marker translocator protein(TSPO) is down-regulated on pro-inflammatory 'M1' human macrophages[J/OL]. PLoS One, 2017, 12(10): e0185767[2017-11-19]. https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/pmid/28968465. DOI: 10.1371/journal.pone.0185767.eCollection2017. [4] Shao X, Wang X, English SJ, et al. Imaging of carrageenan-induced local inflammation and adjuvant-induced systemic arthritis with[11C]PBR28PET[J]. Nucl Med Biol, 2013, 40(7):906-911. DOI:10.1016/j.nucmedbio.2013. 06.008. [5] Dupont AC, Largeau B, Santiago Ribeiro MJ, et al. Translocator protein-18 kDa (TSPO) positron emission tomography (PET) imaging and its clinical impact in neurodegenerative diseases[J/OL]. Int J Mol Sci, 2017, 18(4): E785[2017-11-19]. https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/pmid/28387722. DOI: 10.3390/ijms18040785. [6] Wen M, Qu CR, Su XH, et al. A practical process for the synthesis of translocator protein 18 kDa imidazopyridine ligand[J]. Wuhan Univ J Nat Sci, 2014, 19(1):19-26. DOI:10.1007/s11859-014-0973-9. [7] Su X, Cheng K, Liu Y, et al. PET imaging of insulin-like growth factor type 1 receptor expression with a 64Cu-labeled Affibody molecule[J]. Amino Acids, 2015, 47(7):1409-1419. DOI:10.1007/s00726-015-1975-4. [8] Su X, Cheng K, Jeon J, et al. Comparison of two site-specifically 18F-labeled affibodies for PET imaging of EGFR positive tumors[J]. Mol Pharm, 2014, 11(11):3947-3956. DOI:10.1021/mp5003043. [9] 豆晓锋, 张亚飞, 蒋怡臻, 等. 131I标记抗NRP-1单克隆抗体A6在荷瘤裸鼠体内分布和显像研究[J].中华核医学与分子影像杂志, 2014, 34(6):495-499. DOI:10.3760/cma.j.issn.2095-2848. 2014.06.017.
Dou XF, Zhang YF, Jiang YZ, et al. Biodistribution and imaging of 131I labeled anti-neuropilin-1 monoclonal antibody in malignant gliomas xenografts[J]. Chin J Nucl Med Mol Imaging, 2014, 34(6):495-499. doi: 10.3760/cma.j.issn.2095-2848.2014.06.017[10] Neyt S, Vliegen M, Verreet B, et al. Synthesis, in vitro and in vivo small-animal SPECT evaluation of novel technetium labeled bile acid analogues to study(altered) hepatic transporter function[J]. Nucl Med Biol, 2016, 43(10):642-649. DOI:10.1016/j.nucmedbio.2016. 07.001. [11] Chang Y, Wu Y, Wang D, et al. Therapeutic effects of TACI-Ig on rats with adjuvant-induced arthritis via attenuating inflammstory responses[J]. Rheumatology(Oxford), 2011, 50(5):862-870. DOI:10.1093/rheumatology/keq404. [12] Laquintana V, Denora N, Musacchio T, et al. Peripheral benzodiazepine receptor ligand-PLGA polymer conjugates potentially useful as delivery systems of apoptotic agents[J]. J Control Release, 2009, 137(3):185-195. DOI:10.1016/j.jconrel.2009. 04.007. [13] Musacchio T, Laquintana V, Latrofa A, et al. PEG-PE micelles loaded with paclitaxel and surface-modified by a PBR-ligand:synergistic anticancer effect[J]. Mol Pharm, 2009, 6(2):468-479. DOI:10.1021/mp800158c. [14] 张伟, 蔡亮, 陈跃, 等.双功能制剂99Tcm-Gd-DTPA-DG的制备及在荷瘤裸鼠体内的生物分布[J].中华核医学杂志, 2011, 31(2):117-120. DOI:10.3760/cma.j.issn.0253-9780. 2011.02.011.
Zhang W, Cai L, Chen Y, et al. Synthesis and biodistribution of a bi-functional agent 99Tcm-Gd-DTPA-DG in tumor bearing nude mice[J]. Chin J Nucl Med, 2011, 31(2):117-120. doi: 10.3760/cma.j.issn.0253-9780.2011.02.011 -
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