东亚钳蝎是一种广泛分布于中国西北、韩国、外蒙古等东亚地区的蝎子，BmK CT在2000年被成功的纯化出来^[13]，编码BmK CT，全长cDNA序列获得克隆。BmK CT是一个由36个氨基酸组成、含4对二硫键的短链神经毒素蛋白，与CTX有68%的同源性，其氨基酸序列为：MCGPCFTTDANMARKCRECC GGIGK CFGPQCLCNRI。随后Fu等^[14]为了更简单有效地获得BmK CT进行了医学研究，通过原核表达系统pExSecI表达获得了重组BmK CT（recombinant BmK CT，rBmK CT），并且在雄性小白鼠体内进行了毒性实验，结果表明其半数致死量是4.3 mg/kg，远远大于一般的毒素半数致死量，可以安全地用于临床中。

研究表明，离子通道功能的变化与胶质瘤细胞侵袭性生长紧密相关^[15-16]，而蝎毒素能够影响Na⁺、K⁺、Ca²⁺和Cl^-等多个离子通道的状态^[17]。2005年，杨锐等^[18]首次对BmK CT的生物学功能进行了鉴定，结果表明，BmK CT可以显著抑制人恶性胶质瘤细胞（U-251细胞系）表面的氯离子通道电流，并且这种抑制作用在一定程度上是可逆的。随后，Fu等^[19]利用人胶质瘤细胞（SHG-44细胞系）进行了膜片钳实验研究，结果表明，BmK CT以电压依赖性的方式特异性阻滞氯离子通道，随着BmK CT浓度的增加，其阻滞率也越来越高（0.07 μmol/L和0.14 μmol/L的阻滞率分别为17.64%±3.06%和55.86%±2.83%）。

为了确定BmK CT在人脑胶质瘤细胞中潜在的靶向受体，Fu等^[20]将纯化的BmK CT多肽植入大鼠体内培养获得相应的BmK CT多克隆抗体，通过蛋白免疫印迹技术显示这种毒素在胶质瘤细胞中特异性结合的两种蛋白质的分子质量分别为35×10³和80×10³，这些蛋白质可作为与BmK CT相互作用的候选受体。Fu等^[21]最新研究报道，BmK CT能明显抑制胶质瘤细胞分泌MMP-2前体（pro-MMP-2），同时降低MMP-2的活性。本课题组^[22]采用实时荧光定量聚合酶链反应和酶联免疫吸附试验检测BmK CT对MMP2基因和蛋白表达水平的影响，结果表明，大鼠胶质瘤细胞（C6细胞系）经BmK CT处理后，MMP2的mRNA表达未见明显变化，差异无统计学意义；但MMP2的分泌受到显著抑制。

在蝎毒素多肽和离子通道相互作用过程中，静电效应发挥着重要的作用^[23]。为了探究静电效应，Fu等^[24]提出了BmK CT-MMP-2的催化结构域复合模型（a model of BmK CT-MMP-2 catalytic domain complex）。研究中通过将氨基酸残基K和R替换成疏水性的氨基酸残基A而获得BmK CT的4种变异体，包括BmK CTR14K15AA、BmK CTR17A、BmK CTK25A和BmK CTR35A。明胶酶谱分析显示，BmK CT及其变异体均能抑制MMP-2的表达，从而降低胶质瘤细胞的转移率，其中BmK CT、BmK CTK25A、BmK CTR35A比BmK CTR14K15AA、BmK CTR17A的抑制能力强。通过测定各个结构域的总能量显示，BmK CT-MMP-2、BmK CTK25A-MMP-2、BmK CTR35A- MMP-2的催化结构域比BmK CTR14K15AA MMP-2、BmK CTR17A MMP-2的结构域更稳定，结构更紧密。因此，前3者抑制细胞生长转移的能力比后两者强。

随着蝎毒素生物学功能被越来越广泛地揭示，Wang等^[25]首次在体内外的应用研究中证明了BmK毒素能促进U251胶质瘤细胞的凋亡，抑制肿瘤的生长。体外细胞实验表明，给予浓度10 mg/ml的BmK毒素能明显促进U251细胞凋亡，而对BEL7404人肝癌细胞和中国仓鼠CHOC400卵巢细胞的生长无影响。在裸鼠皮下荷瘤模型中，治疗组（给予BmK毒素20 mg/kg）的肿瘤大小和重量均明显小于对照组（给予生理盐水20 mg/kg），分别约为对照组的1/8和1/2。2007年，Fu等^[19]进行的体外研究表明，BmK CT明显抑制胶质瘤细胞的生长，其抑制能力与浓度相关，其半抑制浓度接近0.28 μmol/L。同时也证明了BmK CT对正常脑组织细胞无不良反应。免疫组化实验提示，BmK CT主要分布在正常小鼠的脑、肢体肌肉、心肌等器官组织中。综上实验结果显示，BmK CT融合蛋白在裸鼠模型中能够抑制胶质瘤的增殖和迁移，为胶质瘤的医学诊断和治疗提供了实验依据。

2010年至2011年，本课题组^[26-27]建立了用¹³¹I标记BmK CT的方法并用于对脑胶质瘤裸鼠模型中的肿瘤进行显影。间接标记法获得的¹³¹I-BmK CT放射化学纯度达94%，总产率为35%。体外实验表明，当BmK CT的浓度为0.2 mg/ml时对胶质瘤细胞的抑制率为90.5%，浓度为2 μg/ml时抑制率为60.5%，当¹³¹I-BmK CT放射性浓度为1.85 MGq/ml（浓度小于2 μg/ml）时抑制率为71.2%，¹³¹I-BmK CT抑制细胞增殖和生长能力优于未标记的BmK CT，流式细胞仪分析¹³¹I-BmK CT主要将细胞阻滞在S期。SPECT分析表明，¹³¹I-BmK CT可在裸鼠体内肿瘤处聚集。以上实验结果表明，¹³¹I-BmK CT可作为体内诊断脑胶质瘤的显影剂和靶向治疗药物。

2010年，Fan等^[28]通过C6大鼠模型进行了BmK CT抑制肿瘤增殖和转移、组织分布及代谢动力学的体内实验，结果表明，实验组GST与BmK CT或CTX的生物结合物（GST-BmK CT或GST-CTX）对肿瘤生长的抑制率明显高于生理盐水对照组或单纯GST处理组，GST-BmK CT的抑制率可高达86%；同时GST-BmK CT和GST-CTX实验组在肺部病灶区的肿瘤转移率分别为38%和25%，而对照组转移率为75%。利用¹³¹I或荧光染料Cy5.5标记BmK CT及CTX，然后检测二者在大鼠体内的生物学分布，结果表明，肿瘤组织内GST-BmK CT的ID%/g自注射后30 min至180 min增长了5.62倍，GST-CTX增长了6.34倍；而生理盐水和GST处理组仅分别增长了1.07倍和1.29倍。实验组信号强度明显高于对照组。上述研究表明，GST-BmK CT和GST-CTX能选择性地结合胶质瘤组织。

近期有研究发现，糖原合成激酶-3（glycogen synthase kinase-3，GSK-3）在胶质瘤细胞生长与转移过程中起着重要的作用^[29]，而作为GSK-3抑制剂的氯化锂用于临床治疗双相情感障碍疾病已几十年。Fu等^[21]尝试着将BmK CT和氯化锂联合用于治疗高恶性程度的胶质瘤，结果表明，联合使用BmK CT，一方面可以降低氯化锂用于治疗的药物浓度，避免单独使用高浓度的氯化锂造成的不良反应；另一方面起到了协同作用的效果。联合使用10 mmol/L氯化锂和0.56 μmol/L BmK CT对胶质瘤细胞生长的抑制作用与单独使用20 mmol/L氯化锂的抑制作用相当，并且前者的抑制可被逆转，后者则不能，表明前者的方法比后者更有安全性，降低了肿瘤治疗带来的不良反应。

应用纳米材料作为基因、药物、显像剂等载体已成为研究的热点。2012年，Fu等^[30]将光学显像探针荧光纳米钻（fluorescent nanodiamonds，FND）与BmK CT结合，成功研制了胶质瘤靶向多功能探针FND-BmK CT。研究中使用共聚焦显微镜检测发现，与单纯FND处理的对照组相比，FND-BmK CT处理的实验组中细胞内的FND荧光信号明显高于前者，划痕愈合实验结果提示，FND-BmK CT可显著地抑制肿瘤细胞的迁移能力。FND-BmK CT转运系统为临床更有效地治疗胶质瘤提供了可能与方向。

基因治疗已成为治疗脑胶质瘤的新策略，腺病毒（adenovirus，Ad）介导的细胞毒性表达基因是基因治疗脑胶质瘤的有效辅助方法^[31]。2013年，Du等^[32]通过两步生物结合法，先将BmK CT与穿梭载体pShuttle-IRES-hrGFP-2链接，然后与腺病毒载体pAdEasy-1结合，最终获得了腺病毒与BmK CT的结合物，简称Ad-BmK CT。此结合物在转运BmK CT过程中与MMP-2和（或）pro-MMP-2作用，避免了BmK CT融合蛋白的免疫排斥和降解。体内外实验均证明，Ad-BmK CT明显抑制C6胶质瘤细胞的生长和侵袭。同年，同课题组^[33]构建了由质粒pEGFP-N1介导的BmK CT表达系统，结果显示，pEGFP-N1-BmK CT能明显抑制C6胶质瘤细胞的转移，这为基因治疗胶质瘤提供了有效的途径。

传统的抗肿瘤药物由于缺乏对肿瘤细胞的选择性，不良反应很大，在杀伤肿瘤细胞的同时，正常细胞也被损伤，给患者造成危害，从而影响了患者的生活质量。同时由于血脑屏障的存在，许多可以用来治疗中枢神经系统的药物不能到达靶组织发挥应有的疗效，从而延误了患者的病情。因此寻找新型药物转运系统己成为药学领域的重要研究方向。根据目前的研究结果，BmK CT作为胶质瘤靶向显像与治疗的理想配体具有以下优势：①分子质量小、化学结构稳定紧密；②人工合成可行性高；③络氨酸残基容易与放射性核素及其他分子结合；④体内代谢慢，供研究者进行显像与治疗的时间充足；⑤特异地与胶质瘤结合，而与正常组织细胞不结合；⑥抗肿瘤细胞生长与转移。但应用于胶质瘤的诊断和治疗还需要进行大量工作：优化标记方法的合成产率偏低，标记过程复杂；建立原位脑胶质瘤模型探究颅内肿瘤是否摄取BmK CT及摄取程度；进行长期的安全性检测；如何减少肝脏显像的高本底，优化肿瘤显像效果。