-
尼可胺是以烟酰胺为母体化合物合成的烟酰氨基酸类化合物,该化合物的肿瘤放射增敏作用显著,毒性低[1-3],很有希望成为肿瘤放疗中高效、低毒且有实用前景的放射增敏剂。为了评价尼可胺的安全性,本实验按照一类新药生殖毒性的评价要求[4-5],对尼可胺的一般生殖毒性进行了研究,以期为临床安全用药提供实验依据。
-
高剂量组:给药过程中大鼠挣扎,给药后即刻出现呼吸急促、自主活动减少等毒性反应症状;给药第8日,个别动物出现稀便、背毛竖立;给药第10日,出现稀便、背毛竖立症状的大鼠数量略有增加;给药第14日,稀便、背毛竖立症状基本消失。
中剂量组:给药过程中大鼠挣扎,给药后即刻出现呼吸急促、自主活动减少等毒性反应症状;给药第8日,个别动物出现稀便、背毛竖立;给药第10日,出现稀便、背毛竖立症状的大鼠数量略有增加;给药第13日,稀便、背毛竖立症状基本消失。
低剂量组:给药期间,大鼠一般症状观察指标均未见明显异常。
空白对照组:给药期间,大鼠一般症状观察指标均未见明显异常。
-
给药期间,尼可胺各剂量组大鼠摄食量均呈增长趋势,高、中剂量组给药第7、14、21、28、35日的摄食量几乎均低于空白对照组,且呈剂量-效应关系(随剂量升高,摄食量递减)(表 1)。
组别 大鼠数量 给药时间 7 d 14 d 21 d 28 d 35 d 髙剂量组 25 14.0a 17.6a 18.1a 20.7a 21.6a 中剂量组 25 16.7b 18.3b 19.0b 21.0b 22.5b 低剂量组 25 19.5c 19.4。 20.1。 21.5。 22.8。 空白对照组 25 19.1 18.7 18.8 21.2 22.6 注:表中,a表示与空白对照组相比,t=0.052、0.500、0.322、0.922、0.556,P>0.05;b表示与空白对照组相比,t=0.050、0.620、0.782、0.905、0.965,P>0.05;c表示与空白对照组相比,t=0.653、0.051、0.219、0.882、0.947,P>0.05。 表 1 雄性Wistar大鼠尾静脉注射不同剂量的尼可胺后摄食量的变化
(g/只/d) -
尼可胺各剂量组及空白对照组大鼠交配前随给药时间的增加,体质量均呈增长趋势,各剂量组与空白对照组相应时间点比较,体质量差异无统计学意义(表 2)。
组别 大鼠数量 给药前 给药时间 7 d 14 d 21 d 28 d 35 d 高剂量组 25 133.4±11.8a 161.3±14.4a 206.2±23.1a 235.0±28.0a 267.6±31.9a 296.9±23.9a 中剂量组 25 136.1±ll.lh 151.6±13.2h 202.7±20.6b 233.6±24.5h 260.2±28.7b 291.9±23.2b 低剂量组 25 138.4±13.1c 175.3±14.5c 210.6±17.2c 236.2±18.4c 261.4±20.7c 293.4±14.3c 空白对照组 25 130.0±12.4 175.0±17.6 210.4±20.7 236.3±26.2 270.9±29.9 300.7±22.8 注:表中,a表示与空白对照组相比,t=0.330、0.004、0.515、0.866、0.703、0.567,P>0.05;b表示与空白对照组相比,t=0.079、0.000、0.202、0.716、0.208、0.166,P>0.05;c表示与空白对照组相比,t=0.028、0.955、0.971、0.989、0.204、0.189,P>0.05。 表 2 雄性Wistar大鼠尾静脉注射不同剂量的尼可胺前后体质量变化
[(x±s)g] -
尼可胺各剂量组与空白对照组相比,大鼠精子总数、精子活力及精子活率差异无统计学意义(表 3)。
组别 大鼠数量 精子数(×103个/μl) 精子活率(%) 精子活力(%) Ⅰ级 Ⅱ级 Ⅲ级 Ⅳ级 高剂量组 25 4.3±0.6a 73.4±7.5a 4.6±2.2a 20.6±6.9a 39.4±7.2a 35.4±6.7a 中剂量组 25 4.5±0.5h 72.9±7.9b 6.5±1.8h 21.8±8.6b 33.5±9.4b 38.2±12.3b 低剂量组 25 4.2±0.5c 74.3±9.3c 5.3±2.5c 24.2±10.4c 35.6±8.5c 34.9±11.8c 空白对照组 25 4.4±0.5 73.0±12.0 5.6±3.3 26.5±10.8 34.2±10.2 34.0±16.3 注:表中,a表示与空白对照组相比,t=0.618、0.878、0.325、0.028、0.043、0.615,P>0.05;b表示与空白对照组相比,t=0.471、0.967、0.147、0.097、0.824、0.537,P>0.05;c表示与空白对照组相比,t=0.200、0.679、0.941、0.465、0.599、0.753,P>0.05。 表 3 尼可胺各剂量组雄性Wistar大鼠精子数、精子活率及精子活力的检查结果
(x±s) -
尼可胺各剂量组与空白对照组相比,大鼠生殖器官脏器系数差异无统计学意义(表 4)。
组别 大鼠数量 睾丸 附睾 高剂量组 25 0.86±0.12a 0.30±0.05a 中剂量组 25 0.88±0.12b 0.33±0.07b 低剂量组 25 0.87±0.14c 0.30±0.06c 空白对照组 25 0.84±0.15 0.29±0.05 注:表中,a表示与空白对照组相比,t=0.685、0.557,P>0.05;b表示与空白对照组相比,t= 0.379、0.489,P>0.05;c表示与空白对照组相比,t=0.489、0.477,P>0.05。 表 4 雄性Wistar大鼠尾静脉注射不同剂量的尼可胺后的脏器系数
[(x±s)%] -
尼可胺各剂量组雄性大鼠的交配率未见明显差异(表 5)。
组别 交配动物数 交配成功数 交配率(%) 高剂量组 25 20 80.0 中剂量组 25 21 84.0 低剂量组 25 20 83.3 空白对照组 25 21 87.5 表 5 雄性Wistar大鼠尾静脉注射不同剂量尼可胺后的生殖毒性实验交配率
-
组织病理学检查发现,尼可胺为200 mg/kg及以下剂量时对成年雄性大鼠无生殖毒性作用,在300 mg/kg时对成年雄性大鼠的生殖能力有一定的影响:①睾丸:部分生精小管萎缩,精原细胞、精母细胞及支持细胞均明显脱落,精子细胞数减少(图 1)。②附睾:部分附睾管空虚,无精子或精子数减少;间质散在炎细胞浸润,以淋巴细胞为主;间质成纤维细胞增生(图 2)。
放射增敏剂尼可胺对雄性大鼠生殖毒性的研究
The reproductive toxicity of NiKeAn in male rats
-
摘要:
目的 观察尼可胺对雄性大鼠生殖能力的影响。 方法 将100只健康成年雄性Wistar大鼠随机分为4组:空白对照组(0.9%氯化钠注射液)、尼可胺高剂量组(300 mg/kg)、尼克胺中剂量组(200 mg/kg)和尼克胺低剂量组(100 mg/kg)。雄性大鼠连续尾静脉注射给药5周后(每日1次),与100只雌性Wistar大鼠随机1:1合笼交配,交配后处死雄性大鼠,检查尼可胺对各剂量组雄性大鼠的交配率、精子数量、精子活率、精子活力、脏器系数的影响及睾丸、附睾的组织病理学变化。 结果 200 mg/kg以下剂量对成年雄性大鼠检测的生育指标无明显影响。 结论 200 mg/kg以下剂量对成年雄性大鼠的生殖功能无明显毒性作用。 Abstract:Objective To observe the toxic effects of NiKeAn on the ability of reproduction in male rats. Methods One hundred health adult Wistar rats were randomly divided into 4 groups with 25 in each group. The rats of control groups were given intravenous injections with normal saline and the experimental groups received NiKeAn at doses of 300 mg/kg, 200 mg/kg and 100 mg/kg once per day. All rats were injected for 5 weeks then mated and executed. The coefficient of testicle and epididymis, mating rate, sperm, the percentage of motile sperm, and histopathological changes of testicle and epididymis were detected. Results Under doses of 200 mg/kg concentration of NiKeAn used in this study have no significant influence on the aforementioned parameters. Conclusion Under doses of 200 mg/kg, reproductive function of male rats does not obviously impaired by NiKeAn. -
Key words:
- Preconception injuries /
- Rats, Wistar /
- NiKeAn
-
表 1 雄性Wistar大鼠尾静脉注射不同剂量的尼可胺后摄食量的变化
(g/只/d) 组别 大鼠数量 给药时间 7 d 14 d 21 d 28 d 35 d 髙剂量组 25 14.0a 17.6a 18.1a 20.7a 21.6a 中剂量组 25 16.7b 18.3b 19.0b 21.0b 22.5b 低剂量组 25 19.5c 19.4。 20.1。 21.5。 22.8。 空白对照组 25 19.1 18.7 18.8 21.2 22.6 注:表中,a表示与空白对照组相比,t=0.052、0.500、0.322、0.922、0.556,P>0.05;b表示与空白对照组相比,t=0.050、0.620、0.782、0.905、0.965,P>0.05;c表示与空白对照组相比,t=0.653、0.051、0.219、0.882、0.947,P>0.05。 表 2 雄性Wistar大鼠尾静脉注射不同剂量的尼可胺前后体质量变化
[(x±s)g] 组别 大鼠数量 给药前 给药时间 7 d 14 d 21 d 28 d 35 d 高剂量组 25 133.4±11.8a 161.3±14.4a 206.2±23.1a 235.0±28.0a 267.6±31.9a 296.9±23.9a 中剂量组 25 136.1±ll.lh 151.6±13.2h 202.7±20.6b 233.6±24.5h 260.2±28.7b 291.9±23.2b 低剂量组 25 138.4±13.1c 175.3±14.5c 210.6±17.2c 236.2±18.4c 261.4±20.7c 293.4±14.3c 空白对照组 25 130.0±12.4 175.0±17.6 210.4±20.7 236.3±26.2 270.9±29.9 300.7±22.8 注:表中,a表示与空白对照组相比,t=0.330、0.004、0.515、0.866、0.703、0.567,P>0.05;b表示与空白对照组相比,t=0.079、0.000、0.202、0.716、0.208、0.166,P>0.05;c表示与空白对照组相比,t=0.028、0.955、0.971、0.989、0.204、0.189,P>0.05。 表 3 尼可胺各剂量组雄性Wistar大鼠精子数、精子活率及精子活力的检查结果
(x±s) 组别 大鼠数量 精子数(×103个/μl) 精子活率(%) 精子活力(%) Ⅰ级 Ⅱ级 Ⅲ级 Ⅳ级 高剂量组 25 4.3±0.6a 73.4±7.5a 4.6±2.2a 20.6±6.9a 39.4±7.2a 35.4±6.7a 中剂量组 25 4.5±0.5h 72.9±7.9b 6.5±1.8h 21.8±8.6b 33.5±9.4b 38.2±12.3b 低剂量组 25 4.2±0.5c 74.3±9.3c 5.3±2.5c 24.2±10.4c 35.6±8.5c 34.9±11.8c 空白对照组 25 4.4±0.5 73.0±12.0 5.6±3.3 26.5±10.8 34.2±10.2 34.0±16.3 注:表中,a表示与空白对照组相比,t=0.618、0.878、0.325、0.028、0.043、0.615,P>0.05;b表示与空白对照组相比,t=0.471、0.967、0.147、0.097、0.824、0.537,P>0.05;c表示与空白对照组相比,t=0.200、0.679、0.941、0.465、0.599、0.753,P>0.05。 表 4 雄性Wistar大鼠尾静脉注射不同剂量的尼可胺后的脏器系数
[(x±s)%] 组别 大鼠数量 睾丸 附睾 高剂量组 25 0.86±0.12a 0.30±0.05a 中剂量组 25 0.88±0.12b 0.33±0.07b 低剂量组 25 0.87±0.14c 0.30±0.06c 空白对照组 25 0.84±0.15 0.29±0.05 注:表中,a表示与空白对照组相比,t=0.685、0.557,P>0.05;b表示与空白对照组相比,t= 0.379、0.489,P>0.05;c表示与空白对照组相比,t=0.489、0.477,P>0.05。 表 5 雄性Wistar大鼠尾静脉注射不同剂量尼可胺后的生殖毒性实验交配率
组别 交配动物数 交配成功数 交配率(%) 高剂量组 25 20 80.0 中剂量组 25 21 84.0 低剂量组 25 20 83.3 空白对照组 25 21 87.5 -
[1] Fenton BM, Lord EM, Paoni SF. Enhancement of tumor perfusion and oxygenation by carbogen and nicotinamide during single- and multifraction irradiation. Radiat Res, 2000, 153(1): 75-83. doi: 10.1667/0033-7587(2000)153[0075:EOTPAO]2.0.CO;2 [2] 顾菲, 刘晓秋, 韩英, 等.肿瘤放疗增敏药9401号的细胞毒性和体外放射增敏作用.中国辐射卫生, 2006, 15(4): 392-393. doi: 10.3969/j.issn.1004-714X.2006.04.004
[3] 刘晓秋, 王荣先, 李美佳.放射增效剂9402号对小鼠小肠隐窝上皮细胞增敏作用的研究.中国辐射卫生, 2007, 16(1): 10-11. doi: 10.3969/j.issn.1004-714X.2007.01.005
[4] Huynh PN, Hikim AP, Wang C, et al. Long-term effects of triptolide on spermatogenesis, epididymal sperm function, and fertility in male rats. J Androl, 2000, 21(5): 689-699. [5] Hikim AP, Lue YH, Wang C, et al. Posttesticular antifertility action of triptolide in the male rat: evidence for severe impairment of cauda epididymal sperm ultrastructure. J Androl, 2000, 21(3): 431-437. [6] 应俊, 姚德鸿, 尤建清, 等.精浆中催乳素浓度对精子活动力的影响.生殖与避孕, 1998, 18(3): 183-184.
[7] 胡利民, 姜民, 凌霜, 等.天然冰片与合成冰片对小鼠的一般生殖毒性.毒理学杂志, 2006, 20(4): 275-276. doi: 10.3969/j.issn.1002-3127.2006.04.030
[8] 陈波, 王汉蓉, 刘玉清, 等.风湿平胶囊对大鼠生殖功能及胚胎发育的影响.成都中医药大学学报, 2007, 30(1): 35-38. doi: 10.3969/j.issn.1004-0668.2007.01.015
[9] 人用药物注册技术要求国际协调会指导委员会.药品注册的国际技术要求(安全性部分).周海均, 译.北京: 人民卫生出版社, 2007: 87-120.
[10] 《药物生殖毒性研究技术指导原则》课题研究组. [ZH]GPT1-1药物生殖毒性研究技术指导原则.北京: 国家食品药品监督管理局, 2006.
[11] 楚宁宁, 薛青光, 孙旺吾, 等. P450芳香化酶活性调控对小鼠睾丸和附睾发育及精子发生的影响.安徽农业科学, 2009, 37(29): 14204-14206.