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五鹤续断(Wu-He Dipsacus asper, WHDA)属川续断科, 是多年生草本植物, 药用部位为其干燥根, 主产地为湖北省鹤峰县、五峰县, 其资源丰富, 品质优良[1]。WHDA作为中药原材料, 具有补肝益肾、续接筋骨、抗骨质疏松等功效[2]。相关研究表明, WHDA还具有增强机体免疫功能及抗肿瘤等药理作用, 而且几乎没有毒性[3]。目前, 有关WHDA对辐射损伤组织的保护作用方面的报道较为少见, 为此, 我们通过研究其对小鼠辐射损伤的影响, 为进一步利用WHDA防护辐射损伤提供科学依据。
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6 Gy照射后小鼠体质量减轻、皮毛干枯、精神萎靡、行动迟缓、团缩拱背、视力障碍; WHDA注射组小鼠的上述体征均有所改善(体质量除外)。
WHDA可提高6 Gy照射后小鼠的30 d存活率, 其中, 单纯照射组小鼠的存活率为60%, 平均存活时间为22.5 d, 低剂量给药+照射组存活率为90%, 平均存活时间为28.8 d, 高剂量给药+照射组存活率为80%, 平均存活时间为26.5 d(表 1)。
组别 鼠数 存活数 存活率
(%)平均存
活时间(d)正常对照组 20 20 100 30.0 照射组 20 12 60 22.5 低剂量WHDA+照射组 20 18 90 28.8 高剂量WHDA+照射组 20 16 80 26.5 注: WHDA为五鹤续断。 表 1 WHDA对6 Gy照射小鼠30 d存活率的影响
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辐射后10 d内小鼠的外周血白细胞和血小板数量明显减少(α=0.05, P < 0.01), 红细胞和血红蛋白数量减少不明显。WHDA对辐射损伤小鼠的外周血白细胞及血小板数量的影响见表 2, WHDA组在受照后6 h、第3 d和第6 d时外周血白细胞总数显著高于照射组(α=0.05, P < 0.01);受照后3 d、6 d和9 d时外周血血小板数量显著高于照射组(α=0.05, P < 0.01)。
组别 鼠败 白细胞数 血小板数 6h 3d 6d 9d 6h 3d 6d 9d 正常对照组 5 14.24 ± 1.11 12.78 ±0.75 11.42 ±0.58 14.41 ± 1.23 1060.20 ±36.45 1066.21 ±33.12 1223.11 ±23.98 1175.78 ±13.23 照射组 5 11.34 ±0.48 1.46±0.10 1.19 ±0.08 0.88 ±0.81 1220.78 ±13.78 811.32±41.09 66.09 ± 11.88 16.78 ±3.34 低剂置WHDA+照射组 5 14.44 ±U8 2.5210.08 1.65 ±0.21 1.07 ±0.08 1137.46 ±67.86 1087.30 ±37.45 174.12 ±13.01 54.56 ±6.98 髙剂MWHDA+照射组 5 15.75 ±0.75 12.72 ±0.28 14.51 ±1.15 14.67 ±0.76 1180.08 ±26.54 1167.34 ±68.09 1209.11 ±53.95 1157.91 ± 12.24 注: WHDA为五鹤续断。 表 2 WHDA对6 Gy照射小鼠的外周血白细胞和血小板数的影响
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照射后小鼠体质量明显降低, WHDA对受照射小鼠胸腺、脾脏、肝脏质量均无明显影响(表 3)。
组别 鼠数 体质量(g) 胸腺质量(g) 脾脏质量(g) 肝脏质量(g) 1d 4d 1d 4d 1d 4d 1d 4d 正常对照组 5 18.42 ± 0.4 18.64 ± 0.5 0.065 ± 0.006 0.056 ± 0.0D4 0.074 ± 0.007 0.123 ± 0.003 1.056 ± 0.057 1.198 ± 0.002 照射组 5 16.02 ± 0.4 12.78 ± 0.3 0.019 ± 0.002 0.089 ± 0.001 0.045 ± 0.002 0.015 ± 0.003 1.089 ± 0.049 0.625 ± 0.007 低剂量WHDA+照射组 5 16.04 ± 0.3 13.35 ± 0.4 0.018 ± 0.001 0.005 ± 0.002 0.041 ± 0.002 0.017 ± 0.002 0.981 ± 0.124 0.628 ± 0.002 高剂屋WHDA+照射组 5 19.04 ± 0.5 18.90 ± 0.5 0.049 ± 0.004 0.037 ± 0.001 0.062 ± 0.004 0.193 ± 0.001 1.012 ± 0.032 1.012 ± 0.032 注: 表中,WHDA: 五鹤续断。 表 3 WHDA对6 Gy照射小鼠几种脏器质量的比较
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受照后小鼠血液中SOD活性显著降低, MDA含量增高, WHDA能显著提高血液中SOD活性, 降低MDA含量; 受照后小鼠肝脏中SOD、GSH活性显著降低, MDA含量显著增高, WHDA能显著提高肝脏中SOD活性, 增加GSH含量, 降低MDA含量(表 4, 5)。
组别 鼠数 S0D(U/ml) GSH(mg/ml) MDA(nmoI/ml) 正常对照组 5 362.36 ± 11.28 30.21 ± 1.24 3.38 ±0.55 照射组 5 176.45 ± 17.35 30.62 ± 1.70 6.25 ± 0.61 低剂最WHDA+照射组 5 323.76 ± 13.56 31.76 ± 1.21 5.68 ± 0.68 高剂量WHDA+照射组 5 341.45 ± 20.32 33/78 ± 1.56 4.68 ± 0.74 注: 表中,SOD: 超氧化物歧化酶; CSH: 谷胱甘肽; MDA: 丙二酰二醛; WHDA: 五鹤续断。 表 4 WHDA对6 Gy照射小鼠外周血中SOD、GSH、MDA水平的比较
组别 鼠数 SOD(U/mgprot) GSH(mg/gprot) MDA(nmol/mgprot) 正常对照组 5 214.36 ± 7.78 42.09 ± 115 1.78 ± 0.15 照射组 5 185.47 ± 9.75 30.62 ± 2.30 945 ± 0, 82 低剂量WHDA+照射组 5 205.76 ± 13.80 44.16 ± 2.81 6.86 ± 0.76 高剂量WHDA+照射组 5 212.74 ± 14.68 43.42 ± 3.01 6.90 ± 0, 91 注: 表中,SOD: 超氧化物歧化酶; CSH: 谷胱甘肽; MDA: 丙二酰二醛; WHDA: 五鹤续断。 表 5 WHDA对6 Gy照射小鼠肝脏中SOD、GSH、MDA的含量比较
五鹤续断对辐射损伤小鼠保护作用的研究
Study on radioprotective effect of Wu-He Dipsacus asper in mice
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摘要:
目的 研究五鹤续断(WHDA)注射液对辐射损伤小鼠的保护作用。 方法 将160只昆明种雌性小鼠分为正常对照组、照射组和低剂量WHDA+照射组、高剂量WHDA+照射组,观察其30 d存活率;测定辐射后6 h、3 d、6 d、9 d小鼠的外周血象;测定辐射后小鼠的胸腺、脾脏和肝脏质量;测定辐射后小鼠外周血和肝脏的超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽(GSH)及丙二酰二醛(MDA)水平。 结果 WHDA可提高辐射后小鼠的存活率,对其白细胞及血小板的数量变化有显著影响,但对其胸腺、脾脏、肝脏质量均无明显影响。WHDA还能显著提高辐射后小鼠的SOD活性,增加GSH水平,降低MDA水平。 结论 WHDA对辐射损伤小鼠有明显的保护作用。 Abstract:Objective To study protective effect of Wu-He Dipsacus asper(WHDA)injection on the radiation damaged mice. Methods One hundred and twenty Kunming female mice were divided into normal control group, model control group, Wu-He Dipsacus asper treatment group to observe the 30-day survival rate; measured peripheral blood 6 hours, 3 days, 6 days and 9 days after irradiation, respectively; thymus, spleen and liver weight were detected; superoxide dismutase(SOD), glutathione(GSH), malonyldialdehyde(MDA)in liver and peripheral blood were also detected. Results WHDA can improve the survival rate of mice after radiation, and take a significant influence on white blood cells and platelets, but no obvious effect on the weight of thymus, spleen and liver.In addition, WHDA can improve SOD activity, increased GSH content and decrease MDA content significantly in this study. Conclusion WHDA has obvious protective effect in mice with radiation injury. -
Key words:
- Radiation injuries /
- Radiation protection /
- Wu-He Dipsacus asper
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表 1 WHDA对6 Gy照射小鼠30 d存活率的影响
组别 鼠数 存活数 存活率
(%)平均存
活时间(d)正常对照组 20 20 100 30.0 照射组 20 12 60 22.5 低剂量WHDA+照射组 20 18 90 28.8 高剂量WHDA+照射组 20 16 80 26.5 注: WHDA为五鹤续断。 表 2 WHDA对6 Gy照射小鼠的外周血白细胞和血小板数的影响
(×109/L) 组别 鼠败 白细胞数 血小板数 6h 3d 6d 9d 6h 3d 6d 9d 正常对照组 5 14.24 ± 1.11 12.78 ±0.75 11.42 ±0.58 14.41 ± 1.23 1060.20 ±36.45 1066.21 ±33.12 1223.11 ±23.98 1175.78 ±13.23 照射组 5 11.34 ±0.48 1.46±0.10 1.19 ±0.08 0.88 ±0.81 1220.78 ±13.78 811.32±41.09 66.09 ± 11.88 16.78 ±3.34 低剂置WHDA+照射组 5 14.44 ±U8 2.5210.08 1.65 ±0.21 1.07 ±0.08 1137.46 ±67.86 1087.30 ±37.45 174.12 ±13.01 54.56 ±6.98 髙剂MWHDA+照射组 5 15.75 ±0.75 12.72 ±0.28 14.51 ±1.15 14.67 ±0.76 1180.08 ±26.54 1167.34 ±68.09 1209.11 ±53.95 1157.91 ± 12.24 注: WHDA为五鹤续断。 表 3 WHDA对6 Gy照射小鼠几种脏器质量的比较
组别 鼠数 体质量(g) 胸腺质量(g) 脾脏质量(g) 肝脏质量(g) 1d 4d 1d 4d 1d 4d 1d 4d 正常对照组 5 18.42 ± 0.4 18.64 ± 0.5 0.065 ± 0.006 0.056 ± 0.0D4 0.074 ± 0.007 0.123 ± 0.003 1.056 ± 0.057 1.198 ± 0.002 照射组 5 16.02 ± 0.4 12.78 ± 0.3 0.019 ± 0.002 0.089 ± 0.001 0.045 ± 0.002 0.015 ± 0.003 1.089 ± 0.049 0.625 ± 0.007 低剂量WHDA+照射组 5 16.04 ± 0.3 13.35 ± 0.4 0.018 ± 0.001 0.005 ± 0.002 0.041 ± 0.002 0.017 ± 0.002 0.981 ± 0.124 0.628 ± 0.002 高剂屋WHDA+照射组 5 19.04 ± 0.5 18.90 ± 0.5 0.049 ± 0.004 0.037 ± 0.001 0.062 ± 0.004 0.193 ± 0.001 1.012 ± 0.032 1.012 ± 0.032 注: 表中,WHDA: 五鹤续断。 表 4 WHDA对6 Gy照射小鼠外周血中SOD、GSH、MDA水平的比较
组别 鼠数 S0D(U/ml) GSH(mg/ml) MDA(nmoI/ml) 正常对照组 5 362.36 ± 11.28 30.21 ± 1.24 3.38 ±0.55 照射组 5 176.45 ± 17.35 30.62 ± 1.70 6.25 ± 0.61 低剂最WHDA+照射组 5 323.76 ± 13.56 31.76 ± 1.21 5.68 ± 0.68 高剂量WHDA+照射组 5 341.45 ± 20.32 33/78 ± 1.56 4.68 ± 0.74 注: 表中,SOD: 超氧化物歧化酶; CSH: 谷胱甘肽; MDA: 丙二酰二醛; WHDA: 五鹤续断。 表 5 WHDA对6 Gy照射小鼠肝脏中SOD、GSH、MDA的含量比较
组别 鼠数 SOD(U/mgprot) GSH(mg/gprot) MDA(nmol/mgprot) 正常对照组 5 214.36 ± 7.78 42.09 ± 115 1.78 ± 0.15 照射组 5 185.47 ± 9.75 30.62 ± 2.30 945 ± 0, 82 低剂量WHDA+照射组 5 205.76 ± 13.80 44.16 ± 2.81 6.86 ± 0.76 高剂量WHDA+照射组 5 212.74 ± 14.68 43.42 ± 3.01 6.90 ± 0, 91 注: 表中,SOD: 超氧化物歧化酶; CSH: 谷胱甘肽; MDA: 丙二酰二醛; WHDA: 五鹤续断。 -
[1] 张万福. 湖北"五鹤续断"的地道历史考证及开发前景. 湖北民族学院学报(医学版), 2002, 19(3): 24-26.
[2] 《全国中草药汇编》编写组. 全国中草药汇编(下册). 2版. 北京: 人民卫生出版社, 2000: 135-136.
[3] 严忠红. 川续断根部免疫调节多糖的分离和化学性质. 国外医药: 植物学分册, 1998, 13(3): 122-123.
[4] Valko M, Leibfritz D, Moncol J, et al. Free radicals and antioxidants in normal physiological functions and human disease. Int J Biochem Cell Biol, 2007, 39(1): 44-84. doi: 10.1016/j.biocel.2006.07.001 [5] Yamaguchi S, Sakurada S, Nagumo M. Role of intracellular SOD in protecting human leukemic and cancer cells against superoxide and radiation. Free Radic Biol Med, 1994, 17(5): 389-395. doi: 10.1016/0891-5849(94)90165-1 [6] Fang YZ, Yang S, Wu G. Free radicals, antioxidants, and nutrition. Nutrition, 2002, 18(10): 872-879. doi: 10.1016/S0899-9007(02)00916-4 [7] ShankarB, KumarSS, SainisKB. Generation ofreactive oxygen species and radiation response in lymphocytes and tumor cells. Radiat Res, 2003, 160(4): 478-487. doi: 10.1667/RR3050